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油紅O染色技術(shù)服務
更新時間:2019-12-20   點擊次數(shù):1722次

技術(shù)服務介紹

油紅O對脂滴的染色機制一般認為是物理學上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質(zhì)染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時,油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。

胞周圍在鏡下呈現(xiàn)空泡時,究竟是水樣變性、糖原,還是被溶解的脂肪?就需要用脂質(zhì)染色來幫助鑒別診斷,如脂肪瘤或脂肪肉瘤,脂肪染色呈陽性。腎的透明細胞癌,在癌細胞胞質(zhì)透亮,但脂肪染色為陰性。腎上腺皮脂腺瘤質(zhì)染色也為陽性。動脈粥樣硬化時,可見內(nèi)皮細胞內(nèi)有脂質(zhì)沉著脂滴顯示紅色,細胞核呈淺藍色。

服務流程

油紅O染色步驟

固定:將冰凍切片復溫干燥10min;細胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,5min/次。

染色:入油紅O工作液孵育10-15min;細胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,5min/次,入油紅O工作液37°染色1-2h。

分化:75%酒精分化2s,水洗1min。

復染細胞核:Harris蘇木素復染1-2min左右,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。

封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。

染色結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細胞核藍色。

客戶需知

由于脂肪易溶于有機溶劑,所以一般用冰凍切片染色來顯示。

作脂肪染色的冰凍切片不能太薄,過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。

蘇木素復染時間不能過長。

染色結(jié)果不能長期保存,應盡快觀察及照相。

整個操作過程中注意動作宜輕柔,不宜動作太大,以免脂肪丟失或移位。

甘油明膠常溫下為凝固狀,用前30min放入60°烘箱或入60°溫水促其成液狀,其封片后易產(chǎn)生氣泡,所以要趁甘油明膠從烘箱中拿出來后盡快封片。

封片后如有氣泡不能按壓改玻片也不宜強行扯下蓋玻片,玻片可入60-70°溫水中,讓蓋玻片自行脫落,然后重新封片,以防脂肪移位。

實驗周期

本公司常規(guī)實驗周期為15個工作日。(不含送貨時間)

收費標準

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