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zeta轉(zhuǎn)染試劑--人淋巴懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品說明
更新時間:2022-06-08   點擊次數(shù):799次

 

 人淋巴懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑(Zeta Life)適用貼壁細胞和懸浮細胞,細胞毒性低,轉(zhuǎn)染率,適用細胞廣。用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細胞系和各種原代細胞中。

一、人淋巴懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑(Zeta Life)產(chǎn)品介紹

Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)。

二、產(chǎn)品應(yīng)用

各種細胞類型中的轉(zhuǎn)染效率。

可用于多種真核細胞系的DNA轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染和共轉(zhuǎn)染;

可用于各種原代細胞的DNA轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染;

可轉(zhuǎn)染度難轉(zhuǎn)染的免疫細胞、懸浮細胞,如:T細胞、NK細胞、人淋巴細胞、THP-1等;

可轉(zhuǎn)染siRNA到任何哺乳動物細胞。

 

三、產(chǎn)品說明

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號:AD600075

規(guī)格:0.75ml

3、儲存條件

常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。

 

四、使用說明

1、材料準(zhǔn)備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul(注意:①溶解于無菌雙蒸水或超純水;②無內(nèi)毒素 )

2、操作步驟

提 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,再進行轉(zhuǎn)染。

核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細胞換液:轉(zhuǎn)染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。

分析結(jié)果:質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。


 

五、表現(xiàn)

Zeta Life多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑的尺寸大小是傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑體積的1/10;

本轉(zhuǎn)染試劑是通過細胞內(nèi)?和細胞主動吸收進入細胞;

本轉(zhuǎn)染試劑進入后對細胞膜無物理性損傷,不易出現(xiàn)細胞變形,保持高的細胞活力;

不激活細胞表面或細胞體內(nèi)marker;

可反映真實的細胞通路蛋白原始數(shù)據(jù);

可轉(zhuǎn)染免疫細胞、懸浮細胞等。

 

 

六、注意事項

1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無菌雙蒸水或超純水,但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會下降 80%左右,甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗。

2、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素,內(nèi)毒素對細胞將產(chǎn)生很大的細胞毒性,會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失?。ㄍ扑]使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒)。

3、復(fù)合物的制備過程中是絕對不能用其他任何試劑對核酸或轉(zhuǎn)染試劑進行稀釋,只需將核酸和轉(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合,如果進行了稀釋會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失。

4、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次,室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細胞培養(yǎng)板。

5、轉(zhuǎn)染 24 小時后進行正常換液,不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時后換液。

6、原代細胞、免疫細胞轉(zhuǎn)染時,細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。


 

Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑系列:

品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600025 (Zeta Life原代細胞轉(zhuǎn)染試劑)0.25ml

品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600050 (Zeta Life真核細胞轉(zhuǎn)染試劑)0.5ml

品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600075 (Zeta Life可代謝轉(zhuǎn)染試劑)0.75ml

品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600150 (Zeta Life免疫細胞轉(zhuǎn)染試劑)1.5ml

品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600500 (Zeta Life懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑)5ml

品牌:美國Zeta Life 貨號:AD601000 (Zeta LifeRAW264.7細胞轉(zhuǎn)染試劑)10ml

 

人淋巴懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑(Zeta Life)

Zeta Life介紹:

美國 Zeta Life 公司成立于 1989 年,是無血清細胞培養(yǎng)基 DMEM/F12 主要完成人,有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養(yǎng)基、以及干細胞、免疫細胞及腫瘤細胞等多種不同類型哺乳動物細胞的無血清培養(yǎng)液生產(chǎn)經(jīng)驗;也是目胎牛血清、無血清培養(yǎng)基的 OEM 供應(yīng)商;每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫(yī)師檢驗證明及品質(zhì)測試報告;ZETA LIFE 血清在 100 的無菌間采用全自動方式制造生產(chǎn),具有良好的可再現(xiàn)性及可追溯性。 2018 年 Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)。

 

原創(chuàng)作者:上海創(chuàng)凌生物科技有限公司

 

 

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