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線粒體組學(xué)-線粒體膜電位檢測實驗介紹
更新時間:2022-08-10   點擊次數(shù):781次


技術(shù)原理

JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi),可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測,因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。

實驗方法

Step1:細胞培養(yǎng)

Step2:轉(zhuǎn)染或藥物處理

Step3:細胞收集

Step4:加 JC-1 試劑

Step5:上機檢測

案例展示

流式檢測線粒體膜電位

實驗周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1. 實驗周期:2-3周

2. 交付標(biāo)準(zhǔn):流式檢測圖、比值、原始數(shù)據(jù)、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器)

需確認的信息

1. 樣本的種屬及類型(組織還是細胞)

2. 樣本數(shù)量

3. 是否提供探針

4. 拍照要求、分析要求


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