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3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠介紹以及Biozellen3D基質(zhì)膠可替換品牌介紹
更新時(shí)間:2022-08-01   點(diǎn)擊次數(shù):443次

B-P-00002 培養(yǎng)細(xì)胞類型是:細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞。B-P-00003 培養(yǎng)細(xì)胞類型是:原代細(xì)胞、干細(xì)胞。

B-P-00002 可做實(shí)驗(yàn):3D 細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)、細(xì)胞遷移、小鼠皮下成瘤。B-P-00003 可做實(shí)驗(yàn):3D 類器官培養(yǎng)、細(xì)胞侵襲、3D 細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)、細(xì)胞遷移、小鼠皮下成瘤。

細(xì)胞分離3D基質(zhì)膠套裝(不含酚紅)產(chǎn)品說(shuō)明

1、貨號(hào):B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10

2、規(guī)格:2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

3、儲(chǔ)存條件:干冰運(yùn)輸,-20℃保存,可保存一年。

一、產(chǎn)品描述

Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝包含全套膠體試劑與溶解試劑,可進(jìn)行3D類器官培養(yǎng)與微環(huán)境等相關(guān)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用; 本試劑盒操作便利且可調(diào)控膠體硬度進(jìn)行多種類器官培養(yǎng)測(cè)試;高分子膠體可快速形成水凝膠, 建議操作此培養(yǎng)膠體前詳讀此使用指南。

(Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠材料為植物來(lái)源,無(wú)動(dòng)物成分)

二、應(yīng)用

• 3D類器官培養(yǎng)。

• 適合用于3D類器官藥物篩檢平臺(tái)

三、適用細(xì)胞種類

• 原代細(xì)胞

• 干細(xì)胞

四、細(xì)胞分離3D基質(zhì)膠套裝(不含酚紅)試劑盒組分

五、使用步驟:

A.試劑制備

A基質(zhì)膠:將A基質(zhì)膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘, 確認(rèn)*融解.

C緩沖溶液(1X)制備:使用前將10X C緩沖溶液用冰的無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液(例如: 無(wú)血清DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B.Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠的制備

全部步驟需要在無(wú)菌環(huán)境內(nèi)操作,操作步驟如下:

1. 將24孔培養(yǎng)板放置于冰上預(yù)冷。

2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)后取 2×105~2×107 細(xì)胞與 0.5 毫升 37℃ 培養(yǎng)基均勻混合,并與0.5毫升37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合,最終細(xì)胞密度105~107cells/mL。

注:請(qǐng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進(jìn)行試驗(yàn),貼壁細(xì)胞應(yīng)在~80% 匯合度下培養(yǎng)。

3.取 20-40 微升步驟 2 含細(xì)胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預(yù)冷的培養(yǎng)板上,膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。 注: 測(cè)試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認(rèn)。

4.待膠體成膠后,添加1毫升冰的1X C緩沖溶液,并蓋過(guò)步驟3 的膠溶液,固定 15 分鐘。

5.待15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細(xì)胞生長(zhǎng)之培養(yǎng)基溶液。

6將含有細(xì)胞的膠于37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行7~14天的培養(yǎng),并觀察細(xì)胞球體的形成,按正常培養(yǎng)基更換頻率進(jìn)行更換操作。

C、溶膠與收集細(xì)胞球體準(zhǔn)備程序

小心的將培養(yǎng)基吸取移除,并用1X PBS進(jìn)行清洗。

小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的D緩沖溶液,蓋過(guò)膠滴于室溫反應(yīng) 5分鐘。

溫和的用1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。

將含有細(xì)胞球體的溶液吸入1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘,移除上清液體并收集細(xì)胞球體做分析。

D、收集單顆細(xì)胞準(zhǔn)備程序

在分離單細(xì)胞前,先按上述溶膠與收集細(xì)胞球體準(zhǔn)備程序進(jìn)行操作

1. 添加trypsin-EDTA并與收集的細(xì)胞球體于37°C混合反應(yīng)。

2. 用1毫升移液管混合,直到細(xì)胞體*分解。

3. 待細(xì)胞球體*分解,加入3倍體積的1X PBS,并用1000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心10分鐘,并移除上清液體收集沉淀的單細(xì)胞做分析。



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